您的位置  行业动态  市场动态

有效解决RNase污染问题,使RNA完好无缺!

作者:IVD资讯

RNase污染无处不在

RNase(Ribonuclease,核糖核酸酶)是一类能够催化RNA降解为小分子RNA的核酸酶,广泛存在于真核、原核生物的所有细胞和组织中,通常有极强活性,RNA样本中微量的RNase污染足以导致其完全降解。实验室中RNase污染的主要来源有:

外源性污染源

1)实验中使用的水溶液、反应体系的各组分试剂、枪头等在内的实验耗材;

2)实验大环境的污染,RNase 存在于空气、灰尘和大多数物体表面;

3)实验人员的皮肤或唾液等。

内源性污染源

所有组织样品均含有内源性RNase。

如何从源头上避免RNase污染

RNase的无处不在,使得实验过程中,难以保存RNA样本的完整性,导致实验失败或影响RNA分析的结果。因此,从源头上避免RNase污染十分必要,一方面要严格控制外源性RNase的污染,另一方面要最大限度地抑制内源性的RNase。

控制外源性RNase污染的方法:

1. 操作人员全副武装

在实验过程中戴手套可避免源自人手的RNase污染;触摸皮肤、门把手及普通物体表面后更换手套;

2. 使用专业仪器与试剂

RNA操作专用的移液枪;使用RNase-free的枪头和离心管;使用RNase-free的化合物与试剂;

3. 选择实验操作环境

远离/遮蔽通风孔或开放窗口,走动较少的区域作为RNase-free区域;

4. 其他注意的点

在RNA提取和分析期间,不要进行其他可能引起RNase 污染的实验。

抑制内源性RNase活性的方法

1. 样本保存

组织取样后若不直接提取RNA,要及时用液氮迅速冷冻存于-80°C环境,并尽早进行实验,这样可使RNA的降解达到最少。

2. 添加抑制剂

在细胞裂解液中加入RNase 抑制剂(RNase inhibitor),使破碎细胞与灭活RNase 同步进行,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNase的活性。

RNase抑制剂可有效避免RNase污染

RNase抑制剂(RNase inhibitor,简称RNasin)是存在于人的胎盘中的一种特异性RNase抑制剂,能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活,从而保护RNA的完整度。目前,RNasin主要用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解,还可用于特定RNase活性的鉴定等。

本文转载自其他网站,不代表健康界观点和立场。如有内容和图片的著作权异议,请及时联系我们(邮箱:guikequan@hmkx.cn)

免责声明:本站所有信息均搜集自互联网,并不代表本站观点,本站不对其真实合法性负责。如有信息侵犯了您的权益,请告知,本站将立刻处理。联系QQ:1640731186
  • 标签:征信中心查询,777mi,交通流预测,
  • 编辑:孙宏亮
  • 相关文章